BL5556A 脂质纳米粒RNA转染试剂盒

¥1120 ¥1400
产品货号: BL5556A
品牌: Biosharp/白鲨
规格: 1.5ml
单位:
关键词: BL5556A 脂质纳米粒RNA转染试剂盒

细胞转染

商品详情:

产品简介:

脂质纳米粒RNA转染试剂盒是一种基于脂质纳米粒(LNP)技术研发的新型即用型转染试剂,利用 LNP 独特的跨膜转运和体内逃逸机制,实现对 RNA 高效递送,广泛适用于不同类型 RNA 在贴壁或悬浮的常用细胞中的转染,其中 RNA 类型包括 siRNA、miRNA、 gRNA、mRNA、saRNA 和 circRNA 等。

易用:无需特定包封设备,一步混合即可实现 RNA-LNP 瞬时包封,无需孵育,可立即进行转染,转染后无需更换培养基。

高效:微量样品的包封率可达 80%以上,实现对常用细胞的高效转染。

安全:本品不含乙醇,采用新型生物可降解脂质材料,细胞毒性极低,且经 0.2μm 微孔滤膜过滤。

 

产品组分:

产品编号

产品名称

BL5556A

BL5556B

BL5556C

1

LNP纳米混悬液

1.5ml

3ml

5ml

2

Buffer

8ml

2×8ml

3×8ml

 

使用方法:

细胞转染:

方法一:

  • RNA预混液制备:用Buffer将RNA原液稀释至40ng/μL,siRNA则对应浓度为3pmol/μL。
  • RNA-LNP复合物制备:取RNA预混液加入等体积的LNP纳米混悬液中,用移液枪吹打20次以上或涡旋2-3秒,混匀。
  • 将RNA-LNP复合物加入细胞,轻轻晃动使均匀分散,培养24-48h。

方法二:

  • RNA预混液制备:用Buffer将RNA原液稀释至40ng/μL,siRNA则对应浓度为3pmol/μL。
  • LNP预混液制备:用Buffer将LNP纳米混悬液稀释2倍,吹打混匀。
  • 取RNA预混液加入等体积的LNP预混液中,用移液枪吹打20次以上或涡旋2-3秒,混匀。
  • 将RNA-LNP复合物加入细胞,轻轻晃动使均匀分散,培养24-48h。

CRISPR/Cas9 mRNA+gRNA共转染

  • RNA预混液制备:用Buffer将Cas9mRNA和gRNA原液稀释至总RNA浓度40ng/μl,其中mRNA(μg):gRNA(μg)=1:1~1:2。
  • LNP预混液制备:用Buffer将LNP纳米混悬液稀释2倍,吹打混匀。
  • 取RNA预混液加入等体积的LNP预混液中,用移液枪吹打20次以上或涡旋2-3秒,混匀。
  • 将RNA-LNP复合物加入细胞,轻轻晃动使均匀分散,培养24-48h。

 

注意事项

1、RNA 原液的最佳溶剂为无酶水,且 mRNA 浓度不低于 200ng/μL、短链 RNA 浓度不低于 100ng/μL、siRNA 浓度不低于 10μM。

2、制备 RNA 预混液请确保使用试剂盒专用 Buffer 稀释 RNA 原液,不得使用 PBS 或培养基。

3、请确保 RNA 预混液浓度为 40ng/μL。若多种 RNA 共转染,如 CRISPR Cas9 mRNA 与 gRNA 共转染,则 RNA 预混液浓度为 Cas9 mRNA + gRNA 的总浓度,Cas9 mRNA 与 gRNA 的推荐用量比为 1:1~1:2(mRNA(μg):gRNA(μg))。

4、常见短链 RNA 如 siRNA 如无特殊修饰,1nmol 的质量通常为 13-15μg,准确质量请结合具体序列、修饰情况进行准确计算。

5、RNA/LNP 的比例是 LNP 包封的关键因素,如需增减每孔 RNA 用量,可以按比例增加或减少加入细胞的每孔 RNA-LNP复合物的体积。

6、RNA-LNP复合物在室温条件下可稳定存放 8 小时,请勿置于冷冻条件。

7、转染前后均无需更换细胞培养基,含有血清、双抗的完全培养基对转染效果无明显影响;转染 6h 以后可按细胞常规培养流程,进行换液或其他操作。

8、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

9、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

保存条件:

4℃保存,一年有效。请勿冷冻!

暂无技术参数信息