BL5643A 血液RNA提取试剂盒（磁珠法）

商品详情：

产品简介：

本产品使用超顺磁性微球可以特异性的吸附核酸，通过 DNase I 处理去除 DNA，通过洗涤去除蛋白质、盐类等杂质，洗脱液解离吸附在磁珠上的 RNA，分离纯化得到高质量 RNA。适用于从抗凝处理的新鲜全血样本中提取总 RNA。

产品组分：

使用方法：

1、准备DNase I反应液

取一个 1.5mL 离心管，根据样本数 N，依次加入 80×N μL 的洗脱液、10×N μL 的 10×Reaction Buffer 、10×N μL 的 DNase I，使用移液枪缓慢吸移 20 次或缓慢上下颠倒离心管 20 次混匀后待用。

注意：DNase I、DNase I 反应液不可涡旋！

2、裂解

取新的 1.5mL 离心管，分别加入 200μL 全血样本（不足 200μL 时可用 PBS 或生理盐水补足），再分别加入 400μL 裂解液和 20μL 蛋白酶K，以涡旋振荡器最大转速涡旋震荡 2min。

3、结合

在离心管内分别加入 200μL 异丙醇和 20μL 磁珠悬液，以涡旋振荡器最大转速涡旋震荡 2min，室温静置 15min（间隔 5min 涡旋震荡 30s）。然后将离心管置于磁性分离器上放置 1 min，用移液枪吸弃上清液并取下离心管。

4、洗涤

（1）在离心管内分别加入 600μL 洗涤液Ⅰ（检查是否已加入异丙醇），以涡旋振荡器最大转速涡旋震荡 2min，使磁珠充分重悬（如发现磁珠粘壁，可使用移液枪吸取管内的洗涤液Ⅰ反复吹打下管壁磁珠后再 涡旋震荡 2min），将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，用移液枪吸弃上清液并取下离心管。

（2）重复步骤（1）。

（3）在离心管内分别加入 600μL 洗涤液Ⅱ（检查是否已加入无水乙醇），以涡旋振荡器最大转速涡旋震 荡 2min，将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，用移液枪吸弃上清液后室温静置 3min，取下离心管。

5、DNase I 处理

（1）在离心管内分别加入 100μL DNase I 反应液，使用移液枪吸取管内的 DNase I 反应液反复吹打下管壁磁珠，确认管壁上所有磁珠都被吹打入反应液后再缓慢吸移反应液 20 次使磁珠重悬。

（2）室温静置15-30min。

6、洗涤

（1）在离心管内分别加入 600μL 洗涤液Ⅱ，以涡旋振荡器最大转速涡旋震荡 3min，室温静置 5min。将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，用移液枪吸弃上清液并取下离心管。

（2）在离心管内分别加入 600μL 洗涤液Ⅱ，以涡旋振荡器最大转速涡旋震荡 2min，将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，用移液枪吸弃上清液。

7、干燥

保持离心管于磁性分离器上，室温静置 5 min 后，取下离心管。

注意：干燥过程中若发现反应管中有液体残留时，可用小量程移液器吸弃液体。

8、洗脱

在离心管内分别加入 50-100μL 洗脱液，以涡旋振荡器最大转速涡旋震荡 2min，室温静置 5min。将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，转移上清液至新的离心管中，此即为纯化得到的 RNA，可保存于-70℃。

注意事项：

• 血液样本的质量对产物 RNA 的完整性有较大影响，应使用新鲜全血样本，避免冻融血液样品。
• 应避免对磁珠进行冷冻、高速离心等操作。磁珠每次取用前应充分重悬均匀。
• 应避免磁珠过度干燥，否则会严重降低核酸洗脱效率。
• 应使用无 RNase 的离心管和枪头。
• 操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。
• 使用前请检查各组分是否存在析出情况，如有析出，请将试剂瓶置于 60℃水浴加热溶解后使用。
• 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件：

-20℃保存，有效期 1 年。