商品详情：
T5核酸外切酶
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产品编号 |
产品名称 |
规格 |
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BL5913A |
T5核酸外切酶 |
1000 U |
产品简介：
T5 Exonuclease 是一种核酸外切酶，沿5→3'方向从双链或单链 DNA 的 5' 末端消化 DNA，同时也可从线性或环状双链 DNA 的缺刻或缺口处对 DNA 进行消化。但 T5 Exonuclease 无法消化超螺旋DNA，此外，当溶液中的 Mg²⁺浓度低于1 mM 时，T5 Exonuclease对单链 DNA 的消化活性也会受到抑制。因此，T5 Exonuclease 尤其适用于从质粒中降解线性化与缺刻质粒、去除连接产物中的非环状DNA、无缝克隆(Gibson Assembly)等。
产品组分：
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组分名称 |
规格 |
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T5 Exonuclease (10 U/μL) |
100 μL |
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10× Buffer D |
1 mL |
酶活定义
1 活性单位 (U) 是指以鲑鱼精 DNA 为 底 物，37 ℃，1× Buffer D 条件下，每分钟使反应液 A260 变化 0.00032 所需的酶量。
产品应用
- 降解线性单链、双链 DNA 或缺刻质粒 DNA。
- 去除环化双链 DNA 中的不完全连接产物。
- 去除碱裂法提取质粒过程中产生的变性质粒 DNA，降解线性和缺刻质粒 DNA，获得高纯度的超螺旋质粒 DNA。
- 提高小提质粒 cDNA 文库的转染效率。
- 常用于 Gibson 组装 (Gibson Assembly)。
质量控制
蛋白纯度检测：
使用 SDS-PAGE 凝胶电泳检测，蛋白纯度不低于 95%。
内切酶残留检测：
将 10 U T5 Exonuclease 与 1 μg 超螺旋质粒 DNA 在 37℃下，共同温育 4 h 后，使用琼脂糖凝胶电泳检测，少于 10% 的质粒 DNA转变成缺刻状态。
宿主 DNA 残留检测：
使用大肠杆菌 16S rDNA 特异性引物，采用荧光定量 PCR 法检测 10 U T5 Exonuclease，大肠杆菌宿主基因组 DNA 残留低于 1copy。
使用方法：
详见说明书。
注意事项：
- 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：
-20℃储存，2年有效。
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