BS409-25ml Epoxy-activated Sepharose 4FF 填料

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产品简介：

Epoxy-activated Sepharose 4FF和Epoxy-activated Sepharose 6FF是环氧基活化形成的琼脂糖凝胶微球基质。该产品具有使用方便、偶联条件较温和、偶联效率高和应用范围广（偶联氨基、巯基和羟基）的特点。

产品特点：

1：层析柱20 cm × 1.6 cm，填料高度10±2cm，常温，溶液为H₂O的条件下检测。

2：耐压为扣除系统压力后的净压力。

使用方法：

Epoxy-activated Sepharose 4FF、Epoxy-activated Sepharose 6FF活化偶联介质广泛用于各种蛋白质的偶联。推荐操作步骤如下：

1、清洗：用10-20倍胶体积的去离子水冲洗（大于5次）环氧活化胶，除去保存液。将清洗干净的胶装入反应器中。

2、偶联：称取一定量的蛋白，溶解于适合的缓冲体系中并用氢氧化钠或盐酸调所需pH，再加入到抽干的活化胶中，在摇床上振荡，合适的温度下反应；反应完毕后进行清洗，清洗到pH为中性。反应条件（pH、温度、时间、配基加入量）需要根据配基的特性和应用的需求进行适当调整。若配基含有游离巯基，可选用硼酸缓冲液，pH根据蛋白特性进行调整。

注意：偶联缓冲液可选用磷酸盐、碳酸盐、硼酸盐、盐酸和氢氧化钠溶液；偶联条件的选择则需要兼顾蛋白的稳定性。

3、封闭：将反应胶加入到三角瓶中，加入适量1mol/L乙醇胺（pH需要用盐酸调节到蛋白所能承受的pH范围）。根据蛋白特性设定反应温度、搅拌转速，反应时间4h。反应停止后将料液转移到砂芯漏斗中抽干，用去离子水清洗。

4、清洗：偶联蛋白的介质依次用5倍的去离子水清洗3-5次，接着用蛋白最适缓冲溶液清洗5遍，再用去离子水充分洗涤3次。抽干，加适量保存液保存，建议用胶的体积与保存液体积比为2:1保存。

注意事项：

1、偶联方法没有统一的模式，都需要根据每种蛋白自身的特点，进行分析论证，经过大量实验验证才能得到最合理的偶联方法，使偶联效率最高、成本最低同时蛋白产品的性能得到最大展现。

2、蛋白的结构特性对偶联所需活化介质提出特殊匹配的要求，比如大分子量需要长链活化基团匹配，小分子量则可以与短链或长链匹配。

3、实验务必在无菌条件下操作。

4、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件：

2-8℃保存于20%乙醇中，有效期5年。