商品详情：
产品简介：
Ni-TED Sepharose 6FF利用样品组分中的组氨酸与金属离子的亲和吸附进行分离纯化。镍螯合高流速琼脂糖层析介质特异性好，流速快，螯合金属离子更稳定，不易脱落，可以在含有EDTA及DTT的情况下进行目的蛋白高效的纯化。可用于分离纯化多肽、蛋白、核苷酸、磷酸化蛋白及带His标签的重组蛋白。
Ni-TED Sepharose 6FF预装柱是一种以Ni-TED Sepharose 6FF为填料的中压预装柱，操作简单方便。
产品特点：
|
基质 |
6%高度交联琼脂糖 |
|
功能基团 |
N,N,N-3-羧甲基乙二胺（TED） |
|
配基密度 |
50-70μmol Ni2+/mL 介质 |
|
动态结合载量 |
≥20mg组氨酸标签蛋白/mL 介质 |
|
推荐流速 |
<300cm/h |
|
平均粒径 |
90μm |
|
耐受压力 |
0.3MPa |
|
耐受pH |
长期：3-12（脱镍后）；短期在位清洗：2-14 |
|
化学稳定性 |
在常用水相溶液中稳定：0.01M NaOH；0.01M HCl；6M盐酸胍(24h)，1M NaOH(24h)，10mm EDTA(24h)，100mm EDTA (2h)，5mm DTT（24h） |
使用方法：
1、平衡：根据样品的稳定性、活性、等电点选择合适的缓冲液、pH范围，结合缓冲液的浓度为20~50mM，为了抑制非特异性吸附，通常还会在结合缓冲液中加入300mM或500mM的氯化钠。层析实验开始前需测定结合缓冲液电导、pH，以合适的流速平衡层析柱，当仪器检测电导、pH值达到结合缓冲液的初始值说明层析柱平衡好。
2、上样：可以用样品环或泵等装置上样，样品需经孔径为0.45或0.2μm滤膜过滤并脱气处理；样品配制溶液应尽可能与结合缓冲液一致，上样量根据介质的动态结合载量或实际测定载量来确定。
3、清洗：上样后继续用平衡缓冲液清洗至紫外吸收值回归基线。
4、洗脱：金属螯合层析介质通常用pH4-6的缓冲液或者用200-500mM咪唑洗脱目的蛋白，可以采用线性梯度、步级梯度、等度洗脱等方式，可分管收集后确定目的蛋白的洗脱条件。
5、再生：金属螯合层析介质在一次上样、洗脱结束后，为确保下次实验结果的可重复性，需用高浓度的盐冲洗层析柱。
6、层析柱CIP（Cleaning In Place）：金属螯合层析介质在使用后，会结合并聚集大量杂蛋白，造成柱子堵塞，反压增大，影响流速与载量，需要剥落金属离子、清洗、重新螯合金属离子。
（1）缓冲液（如50mM PB、500mM NaCl、200mM EDTA，pH7.0）进行脱去金属离子；
（2）用500mM NaCl溶液冲洗层析柱，除去柱中残留的EDTA；
（3）选用1M NaOH 溶液冲洗多个柱体积以除去沉淀、疏水性较强物质；
（4）选用70%乙醇或30%异丙醇冲洗多个柱体积以除去脂类物质（使用高浓度有机溶剂时，为避免气泡产生，应逐步增加有机溶剂浓度如采取梯度方式）。
注意事项：
1、清洁和再生后的层析介质保存于20%乙醇中，切勿冷冻，建议2-3个月更换一次20%乙醇，防止乙醇挥发导致微生物滋生。
2、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件：
2-8℃保存，有效期5年。
暂无技术参数信息