BS434-5ml Protein G Sepharose 4FF 预装柱

商品详情：

产品简介：

Protein G Sepharose 4FF 是通过溴化氢活化的方式将Protein G固定到Sepharose 4FF基架上而制成的一种亲和介质。Protein G与Protein A相比有着更宽广的结合谱，同时Protein G不仅与抗体Fc片段有着强有力的结合，也和抗体的Fab片段有着弱的相互作用，因此Protein G Sepharose 4FF常用于分离纯化来自细胞培养中的抗体或者抗体片段，以及各种种属的血清中纯化抗体。

Protein G Sepharose 4FF预装柱是一种以Protein G Sepharose 4FF为填料的中压预装柱，操作简单方便。

产品特点：

使用方法：

1、清洗：用2-3倍柱体积的70%乙醇、0.1% TritonX-100清洗，然后立即用不少于5倍柱体积的超纯水清洗。

2、平衡：根据样品的稳定性、活性、等电点选择合适的缓冲液、pH范围，一般来说，结合缓冲液的浓度为20~50mmol/L，为了抑制非特异性吸附通常还会加入300mM或500mM氯化钠。层析实验开始前需测定结合缓冲液电导、pH，以合适的流速平衡层析柱，当仪器检测电导、pH值达到结合缓冲液的初始值说明层析柱平衡好，一般需要2~5倍柱体积。

3、上样：可以用样品环或泵等装置上样，样品需经孔径为0.45或0.22μm滤膜过滤并脱气处理；样品配制溶液应尽可能与结合缓冲液一致，上样量根据介质的动态结合载量或实际测定载量来确定。

4、清洗：上样后继续用平衡缓冲液清洗至紫外吸收值至基线。

5、洗脱：Protein G Sepharose 4FF通常采用pH洗脱，可以采用线性梯度、步级梯度或者直接洗脱等方式，分管收集，根据目的蛋白的出锋位置确定最佳洗脱条件；通常洗脱下来的抗体需要采用中和缓冲液进行中和。

6、再生：Protein G Sepharose 4FF在一次上样、洗脱结束后，为确保下次实验结果的可重复性，可以用数个柱体积的pH为2~3的0.1M柠檬酸缓冲液冲洗，然后再用数个柱体积的平衡缓冲液清洗。

7、层析柱CIP（Cleaning In Place）：Protein G Sepharose 4FF在多次使用后，会结合并聚集大量杂蛋白，造成柱子堵塞，反压增大，影响流速与载量，需要定期对层析柱清洗与再生，根据纯化样品情况选择CIP方式。可以用数个柱体积的0.1%TritonX-100清洗后，再用数个柱体积的平衡缓冲液清洗，或选用数个柱体积的70%乙醇冲洗，再用数个柱体积的平衡缓冲液冲洗。

注意事项：

1、清洁和再生后的层析介质保存于20%乙醇中，切勿冷冻，建议2-3个月更换一次20%乙醇，防止乙醇挥发导致微生物滋生。

2、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件：

2-8℃保存，有效期5年。