BS435-5ml AT Protein A Sepharose 4FF 预装柱

商品详情：

产品简介：

亲和层析介质AT Protein A Sepharose 4FF是将基因工程突变的金黄色葡萄球菌细胞壁重组蛋白Protein A（AT Protein A）通过硫醚键连接于Sepharose 4FF上构成的，可以广泛应用于单克隆抗体和多克隆抗体的分离，具有载量高，配基不易脱落等优势；AT Protein A Sepharose 4FF的配基蛋白经过突变改造，具有良好的碱稳定性，可以耐受0.5M NaOH在位清洗。

AT Protein A Sepharose 4FF预装柱是一种以AT Protein A Sepharose 4FF为填料的中压预装柱，操作简单方便。

产品特点：

使用方法：

1、平衡：根据样品的稳定性、活性、等电点选择合适的缓冲液、pH范围，一般来说，结合缓冲液的浓度为20~50mmol/L，为了抑制非特异性吸附通常还会加入300mM或500mM氯化钠。层析实验开始前需测定结合缓冲液电导、pH，以合适的流速平衡层析柱，当仪器检测电导、pH值达到结合缓冲液的初始值说明层析柱平衡好，一般需要2~5倍柱体积。

2、上样：可以用样品环或泵等装置上样，样品需经孔径为0.45或0.22μm滤膜过滤并脱气处理；样品配置溶液应尽可能与结合缓冲液一致，上样量根据介质的动态结合载量或实际测定载量来确定。

3、清洗：上样后继续用平衡缓冲液清洗至紫外吸收值至基线。

4、洗脱：Protein A Sepharose 4FF通常采用pH洗脱，可以采用线性梯度、步级梯度或者直接洗脱等方式，分管收集，根据目的蛋白的出锋位置确定最佳洗脱条件；通常洗脱下来的抗体需要采用中和缓冲液进行中和。

5、再生：AT Protein A Sepharose 4FF在一次上样、洗脱结束后，为确保下次实验结果的可重复性，可以用数个柱体积的 pH为2~3的0.1M柠檬酸缓冲液冲洗，然后再用数个柱体积的平衡缓冲液清洗。

6、层析柱CIP（Cleaning In Place）：AT Protein A Sepharose 4FF在多次使用后，会结合并聚集大量杂蛋白，造成柱子堵塞，反压增大，影响流速与载量，需要定期对层析柱清洗与再生，根据纯化样品情况选择CIP方式。

（1）选用数个柱体积的2M NaCl冲洗以除去结合能力较强的非特异性结合蛋白；

（2）选用数个柱体积的0.1-0.5M NaOH溶液冲洗以除去沉淀、疏水性较强物质；

（3）冲洗结束后需要用超纯水或缓冲液冲洗至电导、pH稳定。

注意事项：

1、清洁和再生后的层析介质保存于20%乙醇中，切勿冷冻，建议2-3个月更换一次20%乙醇，防止乙醇挥发导致微生物滋生。

2、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件：

2-8℃保存，有效期5年。