BS436-5ml Protein L Sepharose 4FF 预装柱

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产品货号: BS436-5ml
品牌: Biosharp/白鲨
单位:
关键词: BS436-5ml Protein L Sepharose 4FF 预装柱

蛋白纯化试剂

商品详情:

产品简介:

Protein L是一种来源于从消化链球菌马格努斯的免疫球蛋白结合蛋白,与Protein A和Protein G不同,Protein L结合的是抗体分子的轻链。因为没有重链的参与,相比Protein A和Protein G等其他抗体结合蛋白,Protein L可以结合更多种类型的抗体。Protein L可以结合几乎所有含有κ轻链的抗体类型,包括IgG,IgM,IgA,IgE和IgD。

Protein L Sepharose 4FF以高交联度的4%琼脂糖凝胶为基质,大肠杆菌表达的基因重组Protein L为配基,保留了与抗体κ链结合的特性,同时不会影响抗体的抗原结合位点。Protein L与人、小鼠的kappa轻链有较好的结合力,也可能与其他物种的某些kappa亚型有特异性结合。Protein L与兔免疫球蛋白结合力较弱,不结合牛、山羊或绵羊来源的免疫球蛋白。

Protein L Sepharose 4FF预装柱是一种以Protein L Sepharose 4FF为填料的中压预装柱,操作简单方便。

 

产品特点:

基质

4%高度交联琼脂糖

功能基团

重组Protein L

配基密度

10-15mg /mL介质

最高流速

≥600cm/h

平均粒径

90μm

动态载量

≥15mg人IgG/mL

耐受压力

0.3MPa

耐受pH

3-10

化学稳定性

在常用水相溶液中稳定,在1M乙酸(pH4.0)、6M盐酸胍、70%乙醇、30%异丙醇中均稳定。

 

使用方法:

1、平衡:用5倍柱体积的平衡缓冲液(20mM Na2PO4 + 0.15M NaCl,pH 7.0)平衡层析柱,操作流速不高于装柱流速的75%,至流出液电导和pH不变(与平衡液一致)。

2、上样:可以用样品环或泵等装置上样,样品需经孔径为0.45或0.2μm滤膜过滤并脱气处理;样品配制溶液应尽可能与结合缓冲液一致,上样量根据介质的动态结合载量或实际测定载量来确定。

3、清洗:上样后继续用平衡缓冲液清洗至紫外吸收值回归基线。

4、洗脱:用洗脱缓冲液(100mM Glycine,pH 3.0)洗脱,收集流出液(洗脱组分须立即调制中性或者收集至含1/10洗脱体积的中和缓冲液(1M Tris-HCl,pH9.0)中)。可以采用线性梯度、步级梯度、等度洗脱等方式,可分管收集后确定目的蛋白的洗脱条件。

5、层析柱CIP(Cleaning In Place):Protein L Sepharose 4FF亲和层析介质在使用后,会结合并聚集大量杂蛋白,造成柱子堵塞,反压增大,影响流速与载量,需要重新清洗后使用。

(1)去除沉淀物及变性蛋白,可用2倍柱体积的6M盐酸胍清洗,然后立即用5倍柱体积的中性PBS缓冲液平衡至中性。

(2)去除疏水性结合的蛋白、脂蛋白和脂类物质,可用3-4倍柱体积的70%乙醇或2-3倍柱体积的1% TritonX-100清洗(20min以上),然后立即用5倍柱体积的中性PBS缓冲液平衡至中性。

 

注意事项

1、清洁和再生后的层析介质保存于20%乙醇中,切勿冷冻,建议2-3个月更换一次20%乙醇,防止乙醇挥发导致微生物滋生。

2、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

保存条件:

2-8℃保存,有效期5年。

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