商品详情：
产品简介：
GST亲和层析介质是专门设计用于分离纯化谷胱甘肽S-转移酶（GST）标签蛋白、其它来源谷胱甘肽S-转移酶以及和谷胱甘肽具有亲和作用的蛋白的亲和层析介质。GST亲和层析具有操作条件温和、特异性强的特点，有利于蛋白的活性保持和高纯度目标蛋白的快速制备，通常一步亲和层析即可得到高纯度的目标蛋白。
GST Sepharose 4FF亲和层析介质以高交联的琼脂糖凝胶为基质，以谷胱甘肽为配基，通过间隔臂长短和配基密度的合理优化而设计的GST亲和层析介质，该产品具有载量高、特异性强、物理和化学稳定性良好、使用寿命长、易放大的特点。
GST Sepharose 4FF预装柱是一种以GST Sepharose 4FF为填料的中压预装柱，操作简单方便。
产品特点：
|
基质 |
4%高度交联琼脂糖 |
|
功能基团 |
谷胱甘肽 |
|
配基密度 |
2-4mg GSH/mL介质 |
|
最高流速 |
≥600cm/h |
|
平均粒径 |
90μm |
|
动态载量 |
≥10mg GST融合蛋白/mL |
|
耐受压力 |
0.3MPa |
|
耐受pH |
3-12 |
|
化学稳定性 |
在常用水相溶液中稳定，在1M乙酸（pH4.0）、6M盐酸胍、70%乙醇、30%异丙醇中均稳定。 |
使用方法：
1、平衡：用5CV（柱体积）的平衡缓冲液（50mM Tris-HCl + 0.15M NaCl，pH8.0，）平衡层析柱（添加适当浓度（0.1-0.2M）的NaCl可抑制蛋白的非特异性吸附，添加适当浓度（1-10mM）的DTT可提高部分蛋白的稳定性和结合载量），操作流速不高于装柱流速的75%，至流出液电导和pH不变（与平衡液一致）。
2、上样：可以用样品环或泵等装置上样，样品需经孔径为0.45或0.2μm滤膜过滤并脱气处理；样品配制溶液应尽可能与结合缓冲液一致，上样量根据介质的动态结合载量或实际测定载量来确定。
3、清洗：上样后继续用平衡缓冲液清洗至紫外吸收值回归基线。
4、洗脱：用洗脱缓冲液（50mM Tris-HCl+10mM GSH，pH8.0，GSH浓度需要根据目标蛋白的结合力进行适当调整，GSH易被氧化，现用现配）洗脱，收集流出液。可以采用线性梯度、步级梯度、等度洗脱等方式，可分管收集后确定目的蛋白的洗脱条件。
5、再生：GST亲和层析介质在一次上样、洗脱结束后，为确保下次实验结果的可重复性，需用高浓度的盐冲洗层析柱。
6、层析柱CIP（Cleaning In Place）：GST亲和层析介质在使用后，会结合并聚集大量杂蛋白，造成柱子堵塞，反压增大，影响流速与载量，需要重新清洗后使用。
（1）去除沉淀物及变性蛋白，可用2CV 6M盐酸胍清洗，然后立即用5CV中性PBS缓冲液平衡至中性。
（2）去除疏水性结合的蛋白、脂蛋白和脂类物质，可用3-4CV的70%乙醇或30%异丙醇清洗（20min以上），并用3-5CV的纯水冲洗。
（3）也可用2CV 0.01-0.1M的NaOH清洗，然后立即用5CV中性PBS缓冲液平衡至中性（优先采用方法（1）和（2）清洗）。
注意事项：
1、清洁和再生后的层析介质保存于20%乙醇中，切勿冷冻，建议2-3个月更换一次20%乙醇，防止乙醇挥发导致微生物滋生。
2、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件：
2-8℃保存，有效期5年。
暂无技术参数信息