BS440-5ml Streptactin Sepharose 4FF 预装柱

¥1948 ¥2435
产品货号: BS440-5ml
品牌: Biosharp/白鲨
单位:
关键词: BS440-5ml Streptactin Sepharose 4FF 预装柱

蛋白纯化试剂

商品详情:

产品简介:

Streptactin Sepharose 4FF是一种将Streptactin键合在琼脂糖凝胶微球上形成的生物亲和层析分离介质,主要用于纯化Strep II标签蛋白。Strep II标签为8个氨基酸的小标签,由于标签小,仅为1kDa左右,一般不影响融合后蛋白质的结构和功能,常用于融合表达蛋白质的检测和纯化。

Streptactin Sepharose 4FF的配基Streptactin是链霉亲和素(Streptavidin)的突变体,与链霉亲和素相比,Streptactin对Strep II标签的亲和能力至少强10倍以上,能够在温和的条件下与Strep II 融合蛋白结合和解离。由于Streptactin对Strep II标签具有高度特异性,一般一步纯化就能获得高纯度的蛋白质样品。Strep II标签蛋白与Streptactin Sepharose 4FF结合后可使用脱硫生物素竞争方式进行洗脱,该洗脱方式比较温和,一般不会影响蛋白质的性质。如蛋白质能耐受一定的碱,也可用碱液洗脱,比如10mM NaOH等。

Streptactin Sepharose 4FF能耐受较高的碱清洗,可以用0.5M NaOH进行再生清洗和去除热源等。另外,2-(4-羟基苯唑)苯甲酸(HABA)也可用于凝胶再生,过量的HABA能够竞争下脱硫生物素,并且在无HABA的缓冲液中,能将凝胶上的HABA洗脱。

Streptactin Sepharose 4FF预装柱是一种以Streptactin Sepharose 4FF为填料的中压预装柱,操作简单方便。

 

产品特点:

基质

4%高度交联琼脂糖

功能基团

Streptactin

配基密度

≥3mg Streptactin/mL 介质

最高流速

≥300cm/h

平均粒径

90μm

动态载量

≥3mg StrepII-tag蛋白/mL

耐受压力

0.3MPa

耐受pH

短期:2-13;长期:4-11

化学稳定性

在常用水相溶液中稳定,在6M盐酸胍(2h)、8M尿素(2h)、2M NaCl(2h)、50mM DTT(1h)、50mM β-ME(1h)、0.1%SDS(1h)中均稳定。

 

使用方法:

1、平衡:用5CV(柱体积)的平衡缓冲液(100mM Tris-HCl,150mM NaCl,1mM EDTA,pH8.0)平衡层析柱,操作流速不高于装柱流速的75%,至流出液电导和pH不变(与平衡液一致)。

2、上样:可以用样品环或泵等装置上样,样品需经孔径为0.45或0.2μm滤膜过滤并脱气处理;样品配制溶液应尽可能与结合缓冲液一致,上样量根据介质的动态结合载量或实际测定载量来确定。

3、清洗:上样后继续用平衡缓冲液清洗至紫外吸收值回归基线。

4、洗脱:用洗脱缓冲液(结合缓冲液+2.5mM脱硫生物素;或10mM NaOH)洗脱,收集流出液。可以采用线性梯度、步级梯度、等度洗脱等方式,可分管收集后确定目的蛋白的洗脱条件。

5、再生:Streptactin Sepharose 4FF亲和层析介质在一次上样、洗脱结束后,为确保下次实验结果的可重复性,可用(0.5M NaOH;或结合缓冲液+1mM HABA)再生。

6、层析柱CIP(Cleaning In Place):Streptactin Sepharose 4FF亲和层析介质在使用后,会结合并聚集大量杂蛋白,造成柱子堵塞,反压增大,影响流速与载量,需要重新清洗后使用。

(1)可用3CV去离子水清洗;

(2)用5-10CV 0.1M NaOH清洗;

(3)用3-5CV去离子水清洗。

 

注意事项

1、清洁和再生后的层析介质保存于含20%乙醇的1×PBS中,切勿冷冻,2-8℃保存,建议2-3个月更换一次储存液,防止微生物滋生。

2、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

保存条件:

2-8℃保存,有效期5年。

 

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