BS441-5ml Heparin Sepharose 6FF 预装柱

商品详情：

产品简介：

肝素（Heparin）是一种线性聚合物，是由葡萄糖胺、L-艾杜糖醛苷、N-乙酰葡萄糖胺和D-葡萄糖醛酸交替组成的含硫酸酯的酸性多糖，肝素的葡萄糖胺骨架中的仲胺基可与特定生物分子结构形成氢键，同时，肝素分子中存在大量磺酸基和乙酸基，使得肝素带有极强的负电性，可以与其它带正电的基团形成离子键，这两种作用方式使得肝素对多种蛋白具有亲和作用。能和凝血酶、类凝血酶、抗凝血因子III、人凝血因子IX、XI和VIII，也能和人白细胞介素、人前列腺生长因子、重组人血管内皮生长因子、软骨生长因子、重组人角质细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、重组人血小板第四因子、重组人内皮抑素等生物大分子结合，所以肝素亲和层析介质可以用于这类物质的纯化。

Heparin Sepharose 6FF以高流速琼脂糖微球为基质，采用环氧活化工艺，将肝素偶联到琼脂糖凝胶上，该填料具有化学稳定性，配基不易脱落，使用寿命长，使用方便，应用广泛的优点

Heparin Sepharose 6FF预装柱是一种以Heparin Sepharose 6FF为填料的中压预装柱，操作简单方便。

产品特点：

使用方法：

1、平衡：用5CV（柱体积）的平衡缓冲液（20-50mM Tris-HCl或PBS，pH7.4-8.0）平衡层析柱（添加适当浓度（0.1-0.2 M）的NaCl可抑制蛋白的非特异性吸附，操作流速不高于装柱流速的75%，至流出液电导和pH不变（与平衡液一致）。

2、上样：可以用样品环或泵等装置上样，样品需经孔径为0.45或0.2μm滤膜过滤并脱气处理；样品配制溶液应尽可能与结合缓冲液一致，上样量根据介质的动态结合载量或实际测定载量来确定。

3、清洗：上样后继续用平衡缓冲液清洗至紫外吸收值回归基线。

4、洗脱：用用洗脱缓冲液（20-50mM Tris-HCl+1-2M NaCl或PBS+1-2M NaCl，pH7.4-8.0，NaCl浓度需要根据目标蛋白的结合力进行适当调整）洗脱，收集流出液。可以采用线性梯度、步级梯度、等度洗脱等方式，可分管收集后确定目的蛋白的洗脱条件。

5、再生：肝素亲和层析介质在一次上样、洗脱结束后，为确保下次实验结果的可重复性，需用高浓度的盐冲洗层析柱。

6、层析柱CIP（Cleaning In Place）：肝素亲和层析介质在使用后，会结合并聚集大量杂蛋白，造成柱子堵塞，反压增大，影响流速与载量，需要重新清洗后使用。

（1）对于以离子键结合的蛋白，可用2-3CV以上的2M NaCl清洗，并用3CV以上的纯水冲洗。

（2）对沉淀或变性蛋白蛋白，可用0.1M NaOH清洗（1-2h），并用3-10CV平衡液和3CV以上的纯水冲洗，也可用6M盐酸胍或8M脲清洗（0.5-1h）。

（3）对疏水性结合的蛋白，可用0.1-0.5%的非离子去污剂清洗（1-2h），并用3-10CV的纯水冲洗。

注意事项：

1、清洁和再生后的层析介质保存于含20%乙醇的20mM乙酸钠中，2-8℃保存，切勿冷冻，建议2-3个月更换一次储存液，防止微生物滋生。

2、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件：

2-8℃保存，有效期5年。