BS442-5ml Blue Sepharose 6FF（蓝胶）预装柱

商品详情：

产品简介：

染料亲和介质Blue Sepharose 6FF俗称蓝胶，是一种以Sepharose 6FF为基质，以Cibacron Blue F3GA（汽巴蓝）为功能配基的亲和介质，广泛应用于干扰素、白蛋白、脱氢酶等蛋白质的纯化；它的作用方式多样，可与蛋白进行特异性结合，也可通过电荷作用、疏水作用等进行分离纯化。Blue Sepharose 6FF具有结合载量高、配基结合牢、应用范围广等优势。

Blue Sepharose 6FF预装柱是一种以Blue Sepharose 6FF为填料的中压预装柱，操作简单方便。

产品特点：

使用方法：

1、清洗：用2-3倍柱体积的0.5M NaOH清洗，用超纯水清洗至中性

2、平衡：根据样品的稳定性、等电点选择合适的缓冲液种类、浓度、pH范围。结合缓冲液的浓度在5~50mmol/L；一般情况下pH范围在5.5~8.5之间，低pH的结合缓冲液能促进蛋白的结合，金属离子的存在也会使蛋白结合能力增强，将0.1~10mmol/L的金属离子（如Mg2+、Ca2+、Zn2+、Mn2+、Cu2+、Co2+、Fe3+和Al3+）加入到缓冲液中能够增强蛋白质的结合。

3、上样：可以用样品环或泵等装置上样，样品需经孔径为0.45或0.22μm滤膜过滤并脱气处理；样品配制溶液应尽可能与结合缓冲液一致，上样量根据离子交换介质的结合载量或实际测定载量来确定。

4、清洗：上样后继续用平衡缓冲液清洗至紫外吸收峰回归基线。

5、洗脱：离子交换层析有盐浓度、pH、或改变缓冲体系极性来洗脱目的蛋白。如改变洗脱缓冲液的离子强度：通过提高缓冲液中盐的浓度；改变洗脱缓冲液的pH；改变洗脱缓冲液的极性：如加入有机溶剂50%乙二醇、10%二氧杂环乙烷等；也可以加入合适浓度的特异配基，如酶的底物、酶底物生成物、辅因子、抑制剂和活化剂来洗脱目的蛋白。

6、再生：可以采用高pH（0.1M Tris，0.5M NaCl，pH8.5）和低pH（0.1M NaAc，0.5M NaCl，pH4.5）交替清洗方式来去除结合较强的蛋白质使层析柱再生。

7、层析柱CIP（Cleaning In Place）：Blue Sepharose 6FF在多次使用后，会结合并聚集大量杂蛋白，造成柱子堵塞，反压增大，影响流速与载量，需要定期对层析柱清洗与再生，根据纯化样品情况选择CIP方式。

（1）选用2M NaCl冲洗多个柱体积以除去结合能力较强的物质；

（2）选用1M NaOH溶液冲洗多个柱体积以除去沉淀、疏水性较强物质；

（3）选用70%乙醇或30%异丙醇冲洗多个柱体积以除去脂类物质（使用高浓度有机溶剂时，为避免气泡产生，应逐步增加有机溶剂浓度如采取梯度方式）；

（4）冲洗结束后需要用超纯水或缓冲液冲洗至电导、pH稳定。

注意事项：

1、清洁和再生后的层析介质保存于含20%乙醇、0.1M KH₂PO₄，pH 8.0的储存液中，2-8℃保存，切勿冷冻，建议2-3个月更换一次储存液，防止微生物滋生。

2、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件：

2-8℃保存，有效期5年。