BS452-5ml DEAE Sepharose HP 预装柱

商品详情：

产品简介：

离子交换层析介质DEAE Sepharose HP是以Sepharose HP为基质，二乙基氨基乙基为配基的一种弱阴离子交换层析介质，与DEAE Sepharose 6FF相比，粒径范围更窄。它保留了琼脂糖天然的亲水性及多孔结构，具有良好的生物兼容性，理化性能稳定，能够耐受强酸、强碱，可以在位清洗与高温灭菌。

离子交换层析技术依据生物分子表面净电荷差异实现分离，DEAE Sepharose HP应用广泛，其操作简便、易于再生、选择性好、回收率高、非特异性吸附低、结合载量高，可用于去除DNA、病毒、内毒素、酸性的宿主细胞蛋白等，适合各种规模生物分子的初期捕获或中度纯化。

DEAE Sepharose HP预装柱是一种以DEAE Sepharose HP为填料的中压预装柱，操作简单方便。

产品特点：

使用方法：

1、平衡：根据样品的稳定性、活性、等电点选择合适的缓冲液种类、pH范围，离子交换层析时需要结合缓冲液和洗脱缓冲液，一般来说，阴离子交换层析选择阴离子交换推荐缓冲液，结合缓冲液的浓度在20~50mmol/L，pH一般高于目的蛋白等电点1~3个pH单位，层析实验开始前测定结合缓冲液电导、pH，以合适的流速平衡层析柱，当仪器检测电导、pH值达到结合缓冲液的初始值说明层析柱平衡好，一般需要2~5个柱体积。

2、上样：可以用样品环或泵等装置上样，样品需经孔径为0.45或0.22μm滤膜过滤并脱气处理；样品配制溶液应尽可能与结合缓冲液一致，上样量根据离子交换介质的结合载量来确定。

3、清洗：上样后继续用平衡缓冲液清洗直至紫外吸收值回归基线。

4、洗脱：离子交换层析有盐浓度、pH两种洗脱类型，可采用线性梯度、步级梯度、等度洗脱等方式，根据需要可分管收集样品确定目的蛋白洗脱条件。

5、再生：离子交换层析介质在一次上样、洗脱结束后，为确保下次实验结果的可重复性，需用高浓度的盐，比如1~2M氯化钠冲洗层析柱，特殊情况下也可再用0.5~1M氢氧化钠冲洗层析柱，注意，一定要用超纯水或结合缓冲液将层析柱冲洗至离子强度、pH稳定方可继续平衡再次使用。

6、层析柱CIP（Cleaning In Place）：离子交换层析柱在多次使用后，会结合并聚集大量杂蛋白，造成柱子堵塞，反压增大，影响流速与载量，需要定期对层析柱清洗与再生，根据纯化样品情况选择CIP方式。

（1）选用2M NaCl溶液冲洗多个柱体积以除去结合能力较强的物质；

（2）选用1M NaOH溶液冲洗多个柱体积以除去沉淀、疏水性较强物质；

（3）选用70%乙醇或30%异丙醇冲洗多个柱体积以除去脂类物质（使用高浓度有机溶剂时，为避免气泡产生，应逐步增加有机溶剂浓度如采取梯度方式）；

（4）清洗结束后需要用超纯水或缓冲液冲洗至电导、pH稳定。

注意事项：

1、清洁和再生后的层析介质保存于20%的乙醇中，2-8℃保存，切勿冷冻，建议2-3个月更换一次20%乙醇，防止乙醇挥发导致微生物滋生。

2、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件：

2-8℃保存，有效期5年。