商品详情:
产品简介:
Octyl Sepharose 6FF是以Sepharose 6FF为基质,辛基为功能配基的一种疏水层析介质。具有硬度高、流速快、选择性强、活性回收率高、不污环境等优点,能够耐受强酸、强碱,可以在位清洗与高温灭菌。与反相层析介质相比,配基浓度低,洗脱条件温和,可以更好保持样品生物活性。疏水作用层析是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立起来的层析技术;疏水层析中,结合力主要受到配基类型、缓冲盐、层析温度、pH等影响。
Octyl Sepharose 6FF预装柱是一种以Octyl Sepharose 6FF为填料的中压预装柱,操作简单方便。
产品特点:
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基质 |
6%高度交联琼脂糖 |
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配基 |
-CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH3 |
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配基浓度 |
5μmol/mL介质 |
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推荐流速 |
<300cm/h |
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平均粒径 |
90μm |
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耐受压力 |
0.3MPa |
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耐受pH |
短期:2-14;长期:3-13 |
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化学稳定性 |
常用的疏水层析缓冲液、1M氢氧化钠、6M盐酸胍、70%乙醇、1M乙酸。 |
使用方法:
1、清洗:用2-3倍柱体积的0.5M NaOH清洗,用超纯水清洗至中性。
2、平衡:不同离子盐溶、盐析效应不同,根据样品情况,选择合适种类的缓冲液;在疏水层析中,高离子强度能够增加介质与生物分子疏水部位的相互作用,结合缓冲液一般选用含有高浓度盐的基础缓冲液如20mM PB(含1.5M硫酸铵)pH=7.2,以合适的流速平衡层析柱至电导和pH与平衡缓冲液一致。
3、上样:可以用样品环或泵等装置上样,样品需经孔径为0.45或0.22μm滤膜过滤并脱气处理;样品配制溶液应尽可能与结合缓冲液一致(若不一致,调节电导率、pH),上样量根据疏水层析介质的结合载量或者实际测定载量来确定,并考虑杂质情况。
4、清洗:上样后继续用结合缓冲液清洗至紫外吸收值平稳。
5、洗脱:用低盐缓冲液,采用线性梯度、步级梯度方式洗脱,根据需要可分管收集样品确定目的蛋白洗脱条件。
6、再生:疏水层析介质在一次上样、洗脱结束后,为确保下次实验结果的可重复性,可用超纯水、70%乙醇或30%异丙醇冲洗。
7、层析柱CIP(Cleaning In Place):疏水层析柱在多次使用后,会结合并聚集大量杂蛋白,造成柱子堵塞,反压增大,影响流速与载量,需要定期对层析柱清洗与再生,根据纯化样品情况选择CIP方式。
(1)选用超纯水冲洗多个柱体积以除去结合能力较强的物质;
(2)选用1M NaOH溶液冲洗多个柱体积以除去沉淀、疏水性较强物质;
(3)选用70%乙醇或30%异丙醇冲洗多个柱体积以除去脂类物质(使用高浓度有机溶剂时,为避免气泡产生,应逐步增加有机溶剂浓度如采取梯度方式);
(4)冲洗结束后需要用超纯水或缓冲液冲洗至电导、pH稳定。
注意事项:
1、清洁和再生后的层析介质保存于20%乙醇中,2-8℃保存,切勿冷冻,建议2-3个月更换一次20%乙醇,防止乙醇挥发导致微生物滋生。
2、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:
2-8℃保存,有效期5年。
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